miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用_瘢痕_增生_细胞

摘要:

文题释义:

miRNA:是一种小片段的非编码RNA,能够通过与目的基因靶向结合进而调控其基因表达,并产生相应生物学表现。

增生性瘢痕:是真皮或深部组织损伤或病变后,由新生结缔组织过度增生修复而成的一种皮损。增生性瘢痕多见于创伤、溃疡和局部炎症病变引起的深达真皮层的创面愈合之后,是人体创伤或炎症愈合过程的产物,临床表现为局部隆起的粉红色或紫红色肿块,表面充血、质地偏硬、边缘不突向正常皮肤,伴痒痛症状,治疗上以综合治疗为主。

背景:目前多项研究证实了miRNA影响增生性瘢痕的发生发展,Ⅰ型胶原与增生性瘢痕成纤维细胞密切相关,猜测miR-2116-3p也有可能与增生性瘢痕的发生发展有关系。

目的:探讨miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用。

方法:收集新疆医科大学第一附属医院6例患者的增生性瘢痕组织与6例患者重睑术后正常皮肤组织,采用qRT-PCR法检测miR-2116-3p与Ⅰ型胶原的表达。取增生性瘢痕组织,原代培养第3-6代成纤维细胞,分为阴性对照组、miR-2116-3p模拟物组和miR-2116-3p抑制物组,分别转染对应的序列,用CCK-8法与EdU试剂盒检测细胞增殖活力,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法与Western blot法检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达,双荧光素酶实验验证其靶向结合。

结果与结论:①增生性瘢痕组织中miR-2116-3p的mRNA表达量低于正常皮肤组织(P < 0.01),Ⅰ型胶原的mRNA表达量低于正常皮肤组织

(P < 0.01);②转染后24,48,72 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞活力降低(P < 0.05或P < 0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞活力升高(P < 0.05或P < 0.01);转染后48 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞EdU标记数减少(P < 0.01),miR-2116-3p抑制物组EdU标记数增加(P < 0.05);③转染后24 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组细胞划痕面积、细胞凋亡率增加(P < 0.01),miR-2116-3p抑制物组细胞划痕面积、细胞凋亡率减少(P < 0.01或P < 0.05);④转染后24 h,与阴性对照组比较,miR-2116-3p模拟物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的基因与蛋白表达下降(P < 0.05或P < 0.01),miR-2116-3p抑制物组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达升高(P < 0.01);⑤双荧光素酶实验显示,miR-2116-3p能够与Ⅰ型胶原靶向结合;⑥结果表明,人增生性瘢痕中miR-2116-3p表达下调,miR-2116-3p可能通过靶向抑制Ⅰ型胶原的表达抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移,促进其凋亡。

(田文融)

中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程

关键词: miR-2116-3p, Ⅰ型胶原, 增生性瘢痕, 成纤维细胞, 皮肤纤维化

引用本文:田文融, 左 俊, 余 扬, 齐郁松, 艾 江, 卜盼盼, 赵皎均, 马志伟, 李培培, 马少林. miR-2116-3p在人增生性瘢痕中的表达及作用[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(28): 4480-4486.

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